实验室前阵子买了台奥林巴斯的旧型号机器。给自己大概写写操作流程，以防遗忘，其实也没什么难的。

一. 准备阶段

1. 先打开总电源开关；
2. 打开汞灯（工作30min以上才可关闭，不可以连续反复开关，否则会损坏汞灯）；
3. 预热汞灯15min，使光强稳定。

二. 明场成像

1. 放置样品，打开LED灯，旋转光路模块至明场通道；
2. 在明场下调焦、移动，寻找合适的视野，可通过机器上的旋钮调节光强；
3. 如果需要，可以拍摄明场下的照片（若背景颜色奇怪，则需先在软件上进行自动白平衡）。
4. 拍照前需检查成像模式开关，模式1代表所有光都输出至镜下，电脑处无输出，此时观察效果最好；模式3代表所有光都输出至电脑，镜下无光，此时拍照效果最好；模式2代表各分配一半输出。

三. 荧光成像

1. 关闭LED灯，打开显微镜的汞灯光栅（从●状态切换至○状态）；
2. 旋转光路模块，调节至想观察的通道，如DAPI、FITC等；
3. 检查成像模式开关（模式2和模式3的选择直接决定了拍照时的荧光强度，应保证拍出的所有照片的模式是相同的）
4. 拍照（需要固定曝光时间和标尺，以确保后期荧光定量分析的可靠性）
5. 保持上述参数不变，移动样品，寻找其它感兴趣的视野。

四. 结束拍摄

1. 先关闭汞灯，再关闭总电源；
2. 简单清理一下，确保仪器整洁。

吐槽

这机器在荧光成像时的激发波长和发射波长无法自由调节，是根据常用的商业化染料的光谱定死的。所以对于自己合成的新型染料，如果光谱性质比较反常（比如Stokes位移非常大），那么在这台机器上的成像效果会大打折扣。